綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
?
規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
灰綠曲霉規(guī)格 | Aspergillu | EY-J964094 |
資源名稱: 灰綠曲霉
種屬: Aspergillus glaucus
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然,121℃,15min。
生長(zhǎng)條件: 25-28℃,好氧,產(chǎn)綠孢子
存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱為四級(jí)發(fā)酵。
FCG3B Polyclonal Antibody IgGFc片段低親和力受體Ⅲb抗體
FCG3A Polyclonal Antibody IgGFc片段低親和力受體Ⅲa抗體
IGFI Antibody,IGF1,IGF1,IGF 1,Insulin like growth factor1,Insulin like growth factor 1 IGFI抗體
IGFI Antibody,IGF1,IGF1,IGF 1,Insulin like growth factor1,Insulin like growth factor 1 IGFI抗體
IGFII Antibody,IGF2,IGF2,IGF 2,Insulin like growth factor2,Insulin like growth factor 2 IGFII抗體
IGFBP5 Antibody,IGFBP5,IGFBP5,IGFBP 5,IGFBP5,IGFBP 5 IGFBP5抗體
IGFBP5 Antibody IGFBP5抗體
IGFBP3 Antibody IGFBP3抗體
IGFBP1 Antibody IGFBP1抗體
IFNalpha 2a Antibody IFNalpha 2a抗體
LIPK 脂肪酶家庭成員K抗體 * 0.2ml Abscisic acid,SABA
NHEDC2 線粒體/氫交換蛋白質(zhì)2抗體 * 0.2ml Abscisic acid,SABA
NOC3L/FAD24 脂肪細(xì)胞分因子24 * 0.2ml PEPSIN
Sox9a 轉(zhuǎn)錄因子sox9a抗體 * 0.2ml Ribonuclease A from bovine pancreas
KBP KBP蛋白抗體 * 0.2ml Andarine
Nidogen 2 巢蛋白NID2抗體 * 0.2ml PEPSIN
Nanos3 骨巢蛋白抗體 * 0.2ml Proteinase K
PDE4A8 二酯酶4A8抗體 * 0.2ml Proteinase K
腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)酶聯(lián)免疫試劑盒 Human VEGFR-2/Flk-1 ELISA kit
抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: ssDNA ELISA Kit
RatIerleukin4,IL-4酶聯(lián)免疫試劑盒白介素4(IL-4)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGlathioneperoxidase,GSH-Px酶聯(lián)免疫試劑盒過氧化酶(GSH-Px)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISAKit缺血修飾白蛋白(IMA)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
犬白介素4(IL-4)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊白介素1β(IL-1β)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat Ierleukin 1β,IL-1β ELISA Kit
繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: MIS/AMH ELISA Kit
RatAlpha-fetoprotein,AFP酶聯(lián)免疫試劑盒種胎兒球蛋白/胎蛋白(AFP)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humancailageoligomericprotein,COMP酶聯(lián)免疫試劑盒軟骨寡聚蛋白(COMP)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humandiamineoxidase,DAOELISAKit二氧化酶(DAO)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
灰綠曲霉規(guī)格21號(hào)染色體開放閱讀框56抗體Porcine CCL4L1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 4 Like Protein 1) ELISA Kit
T淋巴細(xì)胞CD1抗體Porcine CD163 (Cluster of Differentiation 163) ELISA Kit
細(xì)胞角蛋白5抗體Porcine CDKN3 (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 3) ELISA Kit
補(bǔ)體C9a抗體Porcine MSMβ (Microseminoprotein Beta) ELISA Kit
20號(hào)染色體開放閱讀框141抗體Porcine PDGFRL (Plaet Derived Growth Factor Receptor Like Protein) ELISA Kit
20號(hào)染色體開放閱讀框160抗體Porcine CENPA (Ceomere Protein A) ELISA Kit
親環(huán)蛋白(親環(huán)素)40抗體Porcine HELIX-Ⅱ(Type Ⅱ Collagen Helical Peptide) ELISA Kit
T細(xì)胞調(diào)控相關(guān)蛋白抗體Porcine PDCN (Podocin) ELISA Kit